Evaluación de la presencia de las caspasas 3 y 7 activas en los espermatozoides de rata, detección in situ vs ex situ /

Las caspasas 3 y 7 activas son consideradas clave en la señalización de la apoptosis en las células somáticas y células germinales testiculares. Existen dos estrategias que permiten identificar a las células que expresan caspasas activas, el marcaje in situ y el marcaje ex situ. El objetivo del pres...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Clasificación:Libro Electrónico
Autor principal: Quezada Vidal, Jesús (autor)
Otros Autores: Aragón Martínez, Andrés (Director), Damián Matzumura, Pablo Gustavo (asesor), Retana Márquez, María del Socorro Imelda (asesor), Arenas Ríos, Edith (sinodal), Reyes Luna, Rosalina María de Lourdes (sinodal), León Galván, Miguel Ángel (sinodal)
Formato: Electrónico eBook
Idioma:Español
Publicado: México : Universidad Autónoma Metropolitana, 2014.
México : Universidad Autónoma Metropolitana, Unidad Iztapalapa, División de Ciencias Biológicas y de la Salud, Departamento de Biología de la Reproducción, 2014.
Temas:
Ratas > Reproducción
Rats > Reproduction
Espermatozoides
Spermatozoa
Apoptosis
Muerte celular
Cell death
Caspasas
Enzimas
Enzymes
Reproducción animal
Reproduction
CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA > 6
Acceso en línea:Texto completo
Descripción
Sumario:Las caspasas 3 y 7 activas son consideradas clave en la señalización de la apoptosis en las células somáticas y células germinales testiculares. Existen dos estrategias que permiten identificar a las células que expresan caspasas activas, el marcaje in situ y el marcaje ex situ. El objetivo del presente trabajo fue investigar si existen diferencias en los porcentajes de espermatozoides marcados con las diferentes estrategias bajo distintos esquemas de inducción o de inhibición de caspasas activas. Las muestras espermáticas se obtuvieron de siete ratas macho (CII-ZV) de 90 días de edad, sexualmente maduros y con fertilidad comprobada. Los espermatozoides con caspasas 3 y 7 activas fueron tratados con el inductor imiquimod (IMQ) o el inhibidor zDEVD o ambos y marcados in situ (FLICA) o ex situ (NucView) o FLICA+NucView, y evaluados por citometría de flujo. Los porcentajes de espermatozoides marcados con FLICA, NucView, IMQ+FLICA e IMQ+NucView no presentaron diferencias significativas; pero hubo diferencias entre los tratamientos IMQ, zDEVD o IMQ+zDEVD y marcados con FLICA+NucVIew. Mediante microscopía de fluorescencia se identificaron espermatozoides marcados con FLICA, y espermatozoides marcados con NucView; pero en un marcaje FLICA+NucView algunos espermatozoides que fueron negativos a FLICA fueron positivos al reactivo de NucView. No se observaron diferencias en los porcentajes de los espermatozoides que expresan caspasas activas cuando se utilizó FLICA o NucView; sin embargo, se presentaron diferencias entre los porcentajes de los espermatozoides que expresan las caspasas 3 y 7 activas cuando los espermatozoides se incubaron con FLICA + NucView.
Active caspases 3- and -7 are considered key in somatic and testicular germ cell apoptosis signalization. Strategies of in situ or ex situ label permits to identify cell expressing active caspases. The goal of the present work was to investigate whether exists differences between percentages of sperm labeled with distinct strategies and treated with inducers or inhibitors of active caspases. Sperm samples were obtained from seven males (CII-ZV), 90 days old, sexually mature and probed fertility. Sperm with active caspases -3 and -7 were treated with the inducer imiquimod (IMQ) or inhibitor zDEVD, or both, and labeled in situ (FLICA) or ex situ (NucView), or FLICA+NucView, and evaluated by flow cytometry. No differences were observed among percentages of sperm labeled with FLICA, NuCView, IMQ+FLICA e IMQ+NucView; however differences among treatments IMQ, zDEVD or IMQ+zDEVD labeled with FLICA+NucVIew. Sperm labeled with FLICA or NucView were identified by fluorescence microscopy, but when FLICA+NucView labeling was realized sperm FLICA negatives and NucView positives were observed. There were not differences between percentages of sperm positives to FLICA or NucView; although percentages of sperm expressing active caspases -3 and -7 were observed when labeling FLICA + NucView was realized.
Notas:Para la realización de los estudios de maestría el alumno Jesús Quezada Vidal contó con el apoyo de la beca institucional de la Universidad Autónoma Metropolitana y la beca CONACYT mediante el número de registro CVU/Becario 418251/302735.
Tesis de Maestría. Maestro en Biología de la Reproducción Animal. Biología de la Reproducción Animal División de Ciencias Biológicas y de la Salud, 2014.
Descripción Física:1 recurso en línea (68 páginas) : ilustraciones.
Bibliografía:Incluye referencias bibliográficas: páginas 59-68
DOI:10.24275/uami.1g05fb76b
Acceso:openAccess

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