Untersuchung der Hyperproduktivität Tierischer Zellkulturen Mittels Metabolomics-Techniken Als Tool der Funktionellen Genomanalyse.

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Detalles Bibliográficos
Clasificación:Libro Electrónico
Autor principal: Thüte, Tobias
Formato: Electrónico eBook
Idioma:Alemán
Publicado: Berlin : Logos Verlag Berlin, 2012.
Colección:Bielefelder Schriften Zur Zellkulturtechnik Ser.
Temas:
Cell culture.
Cellules > Culture.
Cell culture
Acceso en línea:Texto completo

MARC

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505 0 |a Intro; 1 Einleitung; 2 Theorie; 2.1 Techniken der Systembiologie; 2.2 Theoretischer Hintergrund der ProduktivitÃÞt; 2.3 Methoden der Metabolomics-Forschung; 2.3.1 Das Metabolom; 2.3.2 Quenching des Stoffwechsels; 2.3.3 Extraktion; 2.3.4 Massenspektrometrie als Metabolomics-Werkzeug; 2.3.5 Metabolomics-AnsÃÞtze; 2.4 Motivation der Arbeit; 3 Material & Methoden; 3.1 Kultivierung; 3.1.1 Zelllinien; 3.1.2 Bioreaktorkultivierungen; 3.2 Analytik; 3.2.1 Quenching; 3.2.2 Extraktion; 3.2.3 Messmethoden; 3.3 Berechnungen; 3.3.1 Voraussage der Retentionsindices; 3.3.2 Bestimmung der MethodenprÃÞzion. 
505 8 |a 3.3.3 spezifische ProduktivitÃÞt3.3.4 spezifische Verbrauchsraten; 3.3.5 nucleotide energy charge (NEC); 3.3.6 catabolic reduction charge (CRC); 3.3.7 Berechnungen der intrazellulÃÞren Konzentrationen; 3.4 Statistik; 3.4.1 Statistische Versuchsplanung; 3.4.2 Multivariate Analysemethoden; 4 Methodenentwicklung; 4.1 Etablierung des Metabolit-fingerprinting; 4.1.1 Optimierung der Derivatisierungsreaktion; 4.1.2 Ã#x9C;berprÃơfung der DerivatstabilitÃÞt; 4.1.3 Regressionsmodell fÃơr Retentionsindices; 4.1.4 Anlegen einer Metabolitdatenbank; 4.1.5 PrÃÞzision der GC-MS-Methode. 
505 8 |a 4.1.6 Fazit des fingerprinting-Ansatzes5 HyperproduktivitÃÞt; 5.1 Kultivierung; 5.2 Statistik; 5.3 Metabolomische Auswertung; 5.3.1 Nukleotidstoffwechsel; 5.3.2 MethylierungskapazitÃÞt; 5.3.3 Polyaminsynthese; 5.3.4 Methioninzyklus & Folatstoffwechsel; 5.3.5 Zentralstoffwechsel; 5.3.6 Zwischenfazit fÃơr die Biomarkersuche; 6 Markervalidierung; 6.1 Kultivierungen; 6.2 Validierung der Biomarker; 6.2.1 extrazellulÃÞre Verbrauchsraten; 6.2.2 intrazellulÃÞre Adenosinkonzentration; 6.2.3 nucleotide energy charge; 6.2.4 NADH/NADH+-VerhÃÞltnis; 6.2.5 Folataufnahme; 6.2.6 MTX-Konzentrationen. 
505 8 |a 6.2.7 [SAM]/[SAH]-VerhÃÞltnis6.2.8 Valdierungsergebnisse weiterer Biomarker; 6.3 Schlussfolgerungen fÃơr die Biomarkersuche; 7 Ausblick. 
520 8 |a Annotation  |b Die Suche nach einem geeigneten Produktionsklon findet in der biopharmazeutischen Industrie in einem Hochdurchsatzscreening und somit in kleinen Prozessvolumina statt. Die im Multititerplattenmaßstab ausgewählten Klone können jedoch im Produktionsmaßstab andere Wachstums- und Produktionsverhalten aufweisen. Aus diesem Grund wird die Prozessentwicklung parallel mit mehreren Klonen durchgeführt und die Wahl des Produktionsklons erst nach der gesamten Prozessentwicklung getroffen. Um Entwicklungszeit und -kosten zu senken, wäre es allerdings wünschenswert, die endgültigen Produktionseigenschaften von Zellklonen bereits zu dem Zeitpunkt der Klonselektion zu prognostizieren, um somit den Entwicklungsprozess nur mit einem Zellklon durchführen zu können.Im Rahmen dieser Arbeit wurde der Stoffwechsel von Zellklonen mit unterschiedlicher spezifischer Produktivität untersucht und potentielle Biomarker für die Hyperpoduktivität durch statistische Methoden identifiziert. 
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